Becoming With Schizophyllum Commune: Δημιουργήστε έναν στείρο πολιτισμό από τα μανιτάρια που βρέθηκαν: 3 βήματα (με εικόνες)

2024 Συγγραφέας: John Day | [email protected]. Τελευταία τροποποίηση: 2024-01-30 08:38

Αυτό το διδακτικό εστιάζεται στην εξήγηση πώς να δημιουργήσετε μια στείρα καλλιέργεια της κοινότητας Schizophyllum μανιταριών (κοινή ονομασία Split Gill μανιτάρι) σε ένα πιάτο petri χρησιμοποιώντας μανιτάρια που βρέθηκαν. Η κοινότητα Schizophyllum έχει βρεθεί ότι έχει πάνω από 28.000 φύλα, μπορεί να βρεθεί σε όλες τις ηπείρους εκτός από την Ανταρκτική και έχει την ικανότητα (όπως και άλλοι «λευκοί και καφέ μύκητες σήψης») να υποβαθμίζει τη ρύπανση που προκαλεί ενδοκρινικές διαταραχές (πλαστικά, ορμόνες που μιμούνται βιομηχανικά πετροχημικά όπως το λίπασμα Atrazine, ο πλαστικοποιητής Bisphenol-A ή η συνθετική ορμόνη Diethylstilbestrol).

Θα εξετάσω τις τεχνικές ταυτοποίησης άγριων μανιταριών, πώς να φτιάξω ένα θρεπτικό πιάτο άγαρ πέτρι και πώς να χρησιμοποιήσω τα μανιτάρια που βρήκαμε για να καλλιεργήσουμε μια στείρα απομονωμένη καλλιέργεια στο πιάτο πέτρι. Άλλες οδηγίες σε αυτή τη σειρά αφορούν τεχνικές όπως η γενετική ταυτοποίηση των μανιταριών, οι απλές ενζυματικές δοκιμασίες για να ελέγξουν την ικανότητα του μανιταριού να διασπά πλαστικά και τη ρύπανση που μιμείται ορμόνες και πώς να φτιάχνουν τυρί με S. Commune.

Αυτό το έργο προέκυψε από τη συλλογική εργασία της Mary Maggic, της Paula Pin και εμένα κατά τη διάρκεια μιας κατοικίας στο HANGAR στη Βαρκελώνη Ισπανία φθινόπωρο Σεπτέμβριος 2018. Για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με το έργο, διαβάστε ~~ ή παραλείψτε όλα τα Bla Bla και πηγαίνετε κατευθείαν στο Βήμα 1 για το σεμινάριο:)

Οι εικόνες προέρχονται από τα αρχεία Schizophyllum Commune Fanzine can μπορείτε να τα κατεβάσετε δωρεάν εδώ

Κατά τη διάρκεια της κατοικίας οι τρεις κύριοι στόχοι μας ήταν:

1 ~ Ερευνήστε και αφομοιώστε την επιστημονική βιβλιογραφία για την Schizophyllum Commune και τις διάφορες αλληλεπιδράσεις με ορμόνες και ενδοκρινικές διαταραχές των πετροχημικών ρύπων. Το S. Commune είναι ένας από τους πολλούς μύκητες "λευκής και καφέ σήψης" με ικανότητα διάσπασης της ρύπανσης που διαταράσσει την ορμονική και την ενδοκρινική λειτουργία. Αυτοί οι μύκητες τρέφονται από δέντρα με την αποβολή «λιγνοκυτταρινικών» ενζύμων από το δίκτυό τους ή «μυκήλια» και τα ένζυμα είναι σε θέση να διασπάσουν την κυτταρίνη και τη λιγνίνη από τα οποία είναι φτιαγμένα τα δέντρα. Λόγω της δομικής ομοιότητας μεταξύ κυτταρίνης, λιγνίνης και ορμονών EDS 'όπως Atrazine, BPA, Estradiol, Diethylstilbestrol και Nonylphenols, τα "λιγνοκυτταρίτιδα" ένζυμα που εκκρίνονται από τους μύκητες μπορούν επίσης να διασπάσουν μια μεγάλη ποικιλία τοξικών. Επιπλέον, η S. Commune παράγει ανοσοδιεγερτικούς πολυσακχαρίτες που είναι χρήσιμοι ως προληπτικά και θεραπευτικά του καρκίνου (Εγκρίθηκε στην Ιαπωνία για τη θεραπεία καρκίνων του τραχήλου της μήτρας), μπορούν να ενισχύσουν τις φυτοοιστρογονικές ιδιότητες ορισμένων φυτών μέσω ζύμωσης, μπορούν να χρησιμοποιηθούν στη θέση της πυτιάς και του γαλακτοβάκιλου διαδικασίες παρασκευής τυριών και παράγουν ένζυμα διαλύσεως θρόμβων θρομβίνης (χρήσιμα στη θεραπεία της θρόμβωσης). Περιέργως, αυτές οι ίδιες "βήτα-γλυκάνες" που μπορούν να εξαχθούν με βραστό νερό ως θεραπείες για τον καρκίνο και ανοσοδιεγερτικά, χρησιμοποιούνται επίσης από τη βιομηχανία πετρελαίου για την ενίσχυση των αποδόσεων πετρελαίου, συνδέοντας το S. Commune σε έναν βρόχο ανατροφοδότησης με διπλό τρόπο στην παραγωγή ενδοκρινικών διαταραχών πετροχημικά είναι σε θέση να υποβαθμίσει και να επανορθώσει.

2 ~ Αναπτύξτε πρωτόκολλα DIY και DIWO (κάντε το με άλλους) που απλοποιούν αυτές τις αποδείξεις για τη συνεργασία με EDC και μύκητες για τη μετάφραση κωδικοποιημένης επιστημονικής γνώσης σε μια γλώσσα πιο προσβάσιμη. Χρησιμοποιήστε αυτές τις αποδείξεις για την εκπαίδευση, την αμφισβήτηση, την αντίσταση στους μοριακούς αποικισμούς και τη δημιουργία νέων αφηγήσεων σχετικά με τις εξελίξεις πολλών ειδών και τη συλλογική μας μεταλλαξογένεση.

3 ~ Αμφισβήτηση του κυρίαρχου κιθερορυθμιστικού, κεροφοβικού λόγου που περιβάλλει τις χημικές ενδοκρινικές διαταραχές (EDC's). Για να αναφέρω την υποτροφία της Malin Ah-King και της Eva Hayward σχετικά με τα θέματα, "Πολλά ειδησεογραφικά πρακτορεία αναφέρουν αυτές τις τρομακτικές ενδοκρινικές ιστορίες από τις αυλές μας. Σε μια προσπάθεια να αναδείξουμε αυτά τα θέματα-όπως θα περιγράψουμε στα ακόλουθα-τα μέσα ενημέρωσης έχουν φωτίσει μια μεταμόρφωση του Frankenstein που απειλεί το φύλο και τη σεξουαλικότητα. Αντί να αντιμετωπιστούν οι πολλοί άλλοι κίνδυνοι για την υγεία που σχετίζονται με την τοξική έκθεση, τα πιο συγκινητικά και πολεμικά ζητήματα αποτελούν συζήτηση και κριτική απάντηση. Θέτει ερωτήματα: Γιατί το σεξ είναι πιο κεντρικό από τον καρκίνο, αυτοάνοση ασθένεια, Και ακόμη και ο θάνατος; Ποια πολιτιστικά νεύρα (πολλά από τα οποία είναι παγκοσμιοποιημένα), ενεργοποιούνται; Και, για εμάς που έχουμε φεμινιστικές ανησυχίες, πώς αναπροσανατολίζουμε τη συζήτηση μακριά από τον ουσιοκρατισμό, τον σεξισμό και την ετεροκανονικότητα; " (Τοξικά φύλα).

Η κοινότητα Schizophyllum είναι ένας μοναδικός «μύκητας λευκής σήψης» καθώς έχει βρεθεί ότι έχει πάνω από 28.000 γενετικά φύλα. Αυτή η προσαρμογή, θεωρούν πολλοί, επέτρεψε την απίστευτη γενετική ποικιλομορφία αυτού του είδους που υπάρχει σε κάθε ήπειρο σε όλο τον κόσμο εκτός από την Ανταρκτική. Θέλαμε να γιορτάσουμε την όμορφη σεξουαλική πολλαπλότητα αυτού του οργανισμού ως ένα παράδειγμα της περιέργειας της βιολογίας. Ο κυρίαρχος λόγος γύρω από τους EDC στα ΜΜΕ, ακόμη και από περιβαλλοντικούς ακτιβιστές επικεντρώνεται σε μεγάλο βαθμό σε αντιεπιστημονικές αφηγήσεις, ότι αυτά τα μόρια προκαλούν ορισμένες σεξουαλικότητες ή φύλα που η κοινωνία μας παθολογεί, χαρακτηρίζει μη κανονιστικά και συχνά προσπαθεί να εξαλείψει ή να αποφύγει. Όχι μόνο η σεξουαλικά πανικοβλημένη, queer φοβική εστίαση της δημόσιας κατακραυγής για την επιστημονικά μη ρεαλιστική της EDC (οι ορμόνες και οι ενδοκρινικοί διαταράκτες δεν κάνουν τους ανθρώπους να είναι queer ή trans) αλλά αγνοεί όλες τις καταστροφικά πραγματικές επιπτώσεις που μπορούμε να συνδέσουμε με τις EDC: παχυσαρκία, διαταραχές του θυρεοειδούς, ορισμένοι καρκίνοι, μεταξύ άλλων κινδύνων για την υγεία.

Βήμα 1: Βρείτε Schizophyllum Commune Living στην κοινότητά σας

Οι αποστειρωμένες καλλιέργειες εργαστηρίου της Schizophyllum Commune μπορούν να αγοραστούν για περίπου $ 350 από μια μικροβιολογική τράπεζα καλλιέργειας όπως η ATCC … γι 'αυτό επιλέξαμε την καλλιέργεια από άγρια μανιτάρια δωρεάν:)

Το είχα εύκολα γιατί είχα διαβάσει για την Schizophyllum Commune και έτυχε να το παρατηρήσω να μεγαλώνει σε ένα δέντρο μπροστά από το διαμέρισμά μου μια μέρα. Εάν δεν είστε τόσο τυχεροί που πέσατε κατά λάθος στο S. Commune στη γειτονιά σας, θα θελήσετε να πάτε σε μια δασώδη περιοχή για να αναζητήσετε μανιτάρια «αγκύλες» που αναπτύσσονται σε αρρωστημένα σκληρά ξύλα (δέντρα που μοιάζουν να μην κάνουν πολύ καλά) ή πεσμένα δέντρα. Το S. Commune είναι ένας από τους πιο κοινούς υπάρχοντες μύκητες σε όλο τον κόσμο και μπορεί να βρεθεί βασικά οπουδήποτε υπάρχει σκληρό ξύλο για να αναπτυχθεί.

Το Mushroomobserver.org παρέχει μια μεγάλη λεπτομερή περιγραφή για το πού και πότε είναι πιθανό να βρείτε το S. Commune, καθώς και πώς να το προσδιορίσετε και πώς να αποφύγετε "μοιάζοντας" που μπορεί να οδηγήσει σε εσφαλμένη αναγνώριση:

ΤΑΥΤΟΠΟΙΗΣΗ: Το Schizophyllum commune αναγνωρίζεται εύκολα από τα σχισμένα βράγχια, τα πυκνά μαλλιά και το καπάκι σε σχήμα ανεμιστήρα. Το καπάκι έχει πλάτος 1-4,5 εκατοστά και συνήθως σχήμα κελύφους ή ανεμιστήρα με γκρι έως υπόλευκη επιφάνεια. Τα βασιδιοσπόρια είναι 5-7,5 × 2 -3 μικρόμετρα. Ένα παρόμοιο μανιτάρι γνωστό ως «Crimped Gill» Plicaturopsis crispa δεν είναι τόσο διαδεδομένο.

HABITAT: Το Schizophyllum commune αναπτύσσεται σε σκληρό ξύλο χρησιμοποιώντας ένζυμα για την υποβάθμιση της λιγνίνης και προκαλεί «λευκή σήψη». Βρίσκεται λοιπόν στις περισσότερες ξυλώδεις περιοχές. Μπορεί να βρεθεί όλο το χρόνο λόγω της ικανότητάς του να στεγνώνει, να ενυδατώνεται σε καλύτερες συνθήκες και στη συνέχεια να συνεχίζει να σποράρει.

Αυτός ο μύκητας μπορεί να είναι παρασιτικός σε δέντρα μικρής διαμέτρου που βρίσκονται υπό πίεση από άλλους παράγοντες, όπως η ξηρασία.

ΔΕΙΤΕ ΟΜΟΙΟ: Το Plicaturopsis crispa ή το «Crimped Gill» είναι παρόμοιο με το Split Gill. Έχει επίσης καρποφόρο σώμα σε σχήμα κελύφους/ανεμιστήρα. Ωστόσο, το καπάκι είναι κόκκινο καφέ ή κίτρινο καφέ και το κάτω μέρος είναι πολύ διακριτικό. Έχει τσαλακωμένη φλέβα σαν βράγχια που είναι πολύ διαφορετικά από τα σχισμένα βράγχια της κοινότητας Schizophyllum. Το Crimped Gill είναι λιγότερο συνηθισμένο αλλά διακριτικό όταν βρεθεί ».

Βήμα 2: Φτιάξτε θρεπτικά πιάτα άγαρ για το S. Commune για να μεγαλώσετε

Για να απομονώσετε μια κουλτούρα της S. Commune που θα βρείτε, θα χρειαστείτε μερικά πιάτα petri γεμάτα με τροφή για το μανιτάρι. Το εκχύλισμα βύνης Το άγαρ είναι ένα απλό φαγητό για το S. Commune, ή «θρεπτικό μέσο» που μπορεί να παρασκευαστεί με εύκολα προσβάσιμα συστατικά. Είναι επίσης μια καλή πηγή τροφής που πρέπει να χρησιμοποιείτε όταν κάνετε πειράματα ενζυματικής δοκιμασίας με S. Commune και άλλους λευκούς ή καφέ μύκητες σήψης - αυτή η διαδικασία θα καλυφθεί σε ένα άλλο εκπαιδευτικό.

ΠΛΕΟΝ ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Αν είχατε πρόβλημα με την εύρεση του S. Commune, υπάρχουν πολλοί άλλοι μύκητες στην ίδια οικογένεια που μπορούν να καλλιεργηθούν χρησιμοποιώντας τις ίδιες διαδικασίες και είναι εξίσου καλοί, αν όχι καλύτεροι για την υποβάθμιση των ενδοκρινικών διαταραχών ρύπων. Το Turkey Tail (Trametes Versicolor) έχει βρεθεί σε πολλές μελέτες που εξέτασαν εκατοντάδες μύκητες λευκού και καφέ σαπίου ως τους υψηλότερους παραγωγούς των «λιγνοκυτταρινικών» ενζύμων που υποβαθμίζουν την πετροχημική ρύπανση. Τα μανιτάρια στρείδια είναι επίσης πολύ καλά σε αυτό.

Κάνω τη μικροβιολογική μου εργασία σε ένα κοινοτικό εργαστήριο βιολογίας που ονομάζεται BUGSS (Baltimore Underground Science Space), όπου έχω πρόσβαση σε γυάλινα σκεύη, ψηφιακές ζυγαριές, βαθμονομημένους κυλίνδρους, αυτόκλειστο (για αποστείρωση θερμότητας και πίεσης των μέσων) κ.λπ. εμφανίστηκε σε όλο τον κόσμο την τελευταία δεκαετία, οπότε ίσως θελήσετε να ελέγξετε αυτήν τη λίστα για να δείτε αν υπάρχει κάποιο κοντά σας. Εάν δεν έχετε ένα μεγάλο κοινοτικό εργαστήριο όπως αυτό στην περιοχή σας, θα πρέπει να επενδύσετε σε κάποιο βασικό εξοπλισμό για αυτήν τη διαδικασία, όπως:

1 ~ digitalηφιακή ζυγαριά για την ακριβή μέτρηση των συστατικών σας

2 ~ Χύτρα ταχύτητας για την αποστείρωση των μέσων σας με θερμότητα και ατμό

3 dishes Τα πιάτα Petri, που μπορούν να αγοραστούν στο διαδίκτυο αρκετά φθηνά, το επαναχρησιμοποιήσιμο γυαλί ή το πλαστικό μιας χρήσης θα λειτουργήσει, αλλά το επαναχρησιμοποιήσιμο είναι πάντα καλύτερο:)

4 ~ Μερικά γυάλινα σκεύη για ανάμειξη, αποστείρωση και αποθήκευση των συστατικών σας.

Εάν δεν θέλετε να επενδύσετε σε αυτόν τον εξοπλισμό, μπορείτε να βρείτε προγεμισμένες πλάκες άγαρ εκχυλίσματος βύνης για να αγοράσετε σε ιστότοπους όπως το Amazon just θα είναι πιο ακριβό μακροπρόθεσμα αν σκοπεύετε να συνεχίσετε να κάνετε μικροβιολογικές εργασίες.

Υπάρχουν ήδη πολλοί υπέροχοι οδηγοί και βίντεο στο youtube για το πώς να φτιάξετε τα δικά σας πιάτα με θρεπτικά υλικά petri στο σπίτι. Έτσι, αντί να μπω σε πολλές λεπτομέρειες σχετικά με αυτό, θα συνδέσω απλώς ένα ζευγάρι - και θα σας δώσω τη συνταγή για 2% Malt Extract Agar, που είναι τα θρεπτικά μέσα που θα χρησιμοποιήσετε.

Μανιτάρια Freshcap: Οδηγός για το πώς να φτιάξετε πιάτα άγαρ για την καλλιέργεια μανιταριών στο σπίτι

Mykoweb: Ξεκινώντας με την καλλιέργεια μανιταριών

Φύλλο Τεχνικών Δεδομένων Εκχυλίσματος Βύνης Άγαρ

2% άγαρ εκχύλισμα βύνης (MEA) ci Συνταγή για 1 λίτρο:

20g εκχύλισμα βύνης (κοινή προμήθεια μπύρας, μπορείτε να αγοράσετε online)

15g Agar (παράγοντας στερεοποίησης - χρησιμοποιείται για να μαγειρεύεται συχνά, ώστε να μπορεί να αγοραστεί στο διαδίκτυο ή σε ορισμένα παντοπωλεία)

1 λίτρο H20 (συνήθως χρησιμοποιώ νερό αντίστροφης όσμωσης που μπορεί να αγοραστεί στα περισσότερα παντοπωλεία σε κανάτες γαλόνι)

Αυτή η συνταγή μπορεί εύκολα να τροποποιηθεί αν θέλετε να φτιάξετε μικρότερες ποσότητες. Συχνά φτιάχνω μόνο 250 mL κάθε φορά για παράδειγμα, οπότε καταλήγω να χρησιμοποιώ μόνο 5 γραμμάρια εκχυλίσματος βύνης, 3,75 γραμμάρια άγαρ και 250 mL νερό.

Βήμα 3: Εμβολιάστε το πιάτο Petri με μύκητες

Το μανιτάρι που βλέπετε ονομάζεται "καρποφόρο σώμα" είναι μόνο ένα μικρό μέρος του οργανισμού. Το μεγαλύτερο μέρος του σώματός του είναι κρυμμένο στο δέντρο (ή στο έδαφος), καταναλώνοντας το ξύλο. Αυτό το μέρος του μανιταριού ονομάζεται μυκήλιο. Για να καλλιεργήσετε το λευκό νηματώδες, πλοκάμιο, ριζωματικό, μυκηλιακό σώμα του Schizophyllum Commune σε ένα πιάτο petri, θα πάρετε ένα δείγμα του στελέχους, θα αποστειρώσετε και θα το τοποθετήσετε στις πλάκες MEA. Το μυκήλιο θα αναπτυχθεί από το αποστειρωμένο δείγμα πυρήνα μανιταριών και θα αποικίσει το πιάτο petri, μοιάζοντας με ένα λευκό βαμβακερό χαλάκι.

Θα χρειαστείς:

• Οι πλάκες Malt Extract Agar (MEA) που ετοιμάσατε στο προηγούμενο βήμα
• 70% ισοπροπυλική αλκοόλη (τρίψιμο αλκοόλ) και ένα μπουκάλι ψεκασμού
• Χαρτοπετσέτες
• Νυστέρι, ή απλώς ένα ξυράφι από ανοξείδωτο ατσάλι - κόπτης κουτιού θα λειτουργήσει
• μεταλλικές λαβίδες
• γάντια
• Μια φλόγα - Χρησιμοποιώ μια λάμπα alcohaul για αποστείρωση οργάνων, το NonDisjunction έχει ένα εξαιρετικό σεμινάριο για το πώς να το φτιάξετε εδώ.
• Αποστειρωμένη επιφάνεια για κοπή (μόλις χρησιμοποίησα ένα αποστειρωμένο πιάτο petri για αυτό)
• Parafilm, μια μεμβράνη παραφίνης που χρησιμοποιείται για τη σφράγιση πιάτων petri - μπορείτε επίσης να χρησιμοποιήσετε μόνο ταινία κάλυψης εάν δεν το έχετε

ΣΤΕΙΡΩΜΑΤΙΚΗ ΤΕΧΝΙΚΗ:

Το κύριο πράγμα που θέλετε να έχετε κατά νου όταν προσπαθείτε να χρησιμοποιήσετε αποστειρωμένη τεχνική είναι ότι τα βακτήρια και τα σπόρια πέφτουν συνεχώς στον αέρα, οπότε θέλετε να διατηρείτε τα πιάτα petri σας καλυμμένα όσο το δυνατόν περισσότερο. Όταν σηκώνετε τα καπάκια για να ρίξετε μέσα ή εμβολιάζετε, είναι πάντα καλύτερο να κρατάτε το καπάκι ακριβώς πάνω από το πιάτο, επιτρέποντάς σας να έχετε πρόσβαση στο εσωτερικό οριζόντια, αλλά κρατώντας το καπάκι πάνω από το πιάτο για να αποφύγετε την πτώση βακτηρίων. Δεύτερον, είναι ένα γιγαντιαίο συγκρότημα ανθρώπων, βακτηρίων, μυκήτων και άλλων οργανισμών - αν και δεν μπορείτε να το δείτε, περιβάλλεστε από ένα πυκνό σύννεφο μικροβίων που διαχέονται στο σώμα σας. Αντί να κάθεστε απλώς στην επιφάνεια του δέρματός σας, το μικροβίομά σας εκτείνεται στον αέρα-τόσο πολύ, μην κουνάτε ποτέ τα χέρια σας πάνω από το πιάτο petri ή γέρνετε πάνω από το ανοιχτό πιάτο για να κοιτάξετε. Και φοράτε γάντια αν τα έχεις;)

ΡΥΘΜΙΣΤΕ ΤΟΝ ΗΜΙΣΤΕΡΙΛΟ ΧΩΡΟ ΣΑΣ

Επιλέξτε μια μη πορώδη επιφάνεια εργασίας καθαρή από συντρίμμια και σκουπίδια. Spεκάστε την περιοχή με το διάλυμα ισοπροπυλικής αλκοόλης 70% και σκουπίστε το με μια χαρτοπετσέτα. Τοποθετήστε τη φλόγα σας στο κέντρο της περιοχής εργασίας σας και ανάψτε την. Θα θελήσετε να εργαστείτε όσο το δυνατόν πιο κοντά στη φλόγα, επειδή δημιουργεί ένα μικρό στείρο πεδίο γύρω του. Τοποθετήστε τις πλάκες MEA σας στη μία πλευρά και το δείγμα μανιταριών σας σε μια αποστειρωμένη επιφάνεια κοπής στην άλλη πλευρά. Συνήθως χρησιμοποιώ ένα αποστειρωμένο πιάτο petri ως την αποστειρωμένη επιφάνεια κοπής μου καθώς και ένα υπόλοιπο εργαλείου. Ρίξτε λίγη ισοπροπυλική αλκοόλη σε ένα μικρό ποτήρι - θα το χρησιμοποιήσετε για να αποστειρώσετε τη λεπίδα και τα τσιμπιδάκια σας ενώ εργάζεστε.

*¡~ ΕΝΟΝΙΣΜΟΣ*!*

Πριν κάνετε οτιδήποτε, αποστειρώστε τη λεπίδα και τα τσιμπιδάκια σας βυθίζοντάς τα στην ισοπροπυλική αλκοόλη και στη συνέχεια κρατώντας τα πάνω από τη φλόγα για λίγο. Μετά την αποστείρωση, τα ακουμπάτε στην αποστειρωμένη επιφάνεια κοπής σας εάν τα αφήσετε κάτω. Χρησιμοποιώντας το τσιμπιδάκι, κρατήστε το στέλεχος του μανιταριού ακίνητο και κόψτε ένα κομμάτι από το άκρο του. Πάρτε αυτό το κομμάτι και κόψτε όλες τις πλευρές έτσι ώστε να καταλήξετε με ένα μικρό κύβο από πυρήνα μανιταριού με όλες τις εξωτερικές επιφάνειες αφαιρεμένες. Αυτό βοηθά να απαλλαγούμε από όλα τα άλλα μικρόβια που ζουν στο μανιτάρι, ώστε να μην μολύνουν την καλλιέργειά σας. Στη συνέχεια βυθίστε τον πυρήνα του στελέχους στο ισοπροπύλιο για περίπου 30 δευτερόλεπτα, τραβήξτε έξω και αφήστε το να στεγνώσει μέσα στο στείρο πεδίο της φλόγας (μην χρησιμοποιήσετε τη φλόγα για να το στεγνώσετε, αυτό θα σκοτώσει το μανιτάρι). Η φλόγα αποστειρώνει ξανά τα τσιμπιδάκια σας ενώ περιμένετε να στεγνώσει ο πυρήνας του στελέχους. Στη συνέχεια, απλά σηκώστε το καπάκι μιας από τις πλάκες MEA σας τόσο ώστε να σύρετε τις λαβίδες από το πλάι και χρησιμοποιήστε τις αποστειρωμένες λαβίδες για να τοποθετήσετε τον πυρήνα του στελέχους στο κέντρο της πλάκας. Σφραγίστε την πλάκα με παραφιλμ και τις επόμενες εβδομάδες, θα δείτε το S. Commune μυκήλιο να αποικίζει την πλάκα.

Συνήθως φτιάχνω αρκετές πλάκες όταν δουλεύω με άγρια δείγματα, έτσι ώστε αν μολυνθώ, είναι πιο πιθανό να έχω τουλάχιστον μία καθαρή καλλιέργεια.